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應用研究
細菌內毒素單位大小與實驗結果的關系
Date: 2017-07-19 15:48:19
湛江博康海洋生物有限公司
應部分細菌內毒素檢查工作同仁提出的：“選擇每支裝量為0.50、0.25、 0.125EU/ml這種小單位的細菌內毒素工作品直接用做實驗，是否會影響實驗結果”的問題，概述一下我們對這一問題的理解，以供參考！
中國藥典二部附錄《細菌內毒素檢查法》規定“細菌內毒素工作品是用于鱟試劑靈敏度復核和實驗中的陽性（含樣品陽性）對照。”可見細菌內毒素本身的純度與其生物活性的精確度，是直接影響實驗結果可靠性的物質。在國際上（如美國、英國和日本）使用的細菌內毒素工作品，其分裝生產單位一般在100～500ng/瓶?；钚詥挝幌喈斢?00～2500EU/瓶。近年來，中國藥品生物制品檢定所分發的細菌內毒素工作品一般在100～300EU/瓶。為工作的方便，我國的鱟試劑生產供應商提供2～10EU/ml的細菌內毒素對照品，但這種小單位的細菌內毒素較少生產使用。
細菌內毒素是由O特異鏈、核心多糖和類脂A三部分組成，其分子量大小因菌株來源不同而異，分子量一般在5000-25000之間。無論那種菌屬的脂多糖，都是由己糖、氨基己糖、戊糖、半乳糖、庚糖和磷酸己醇胺等單糖以共價鍵構成的親水性低聚糖鏈，并通過酰胺鍵以疏水性的脂肪酸連接的復合分子。特別是類脂A可從O-特異鏈和核心多糖中游離出來自身凝聚成多聚體不溶于水。同時低聚糖鏈中由于脂酰葡萄糖胺的酰胺鍵容易被水解。所以，提純的細菌內毒素實際上是不穩定的。
其次，這種細菌內毒素在分裝生產過程中，因內毒素活性單位稀釋過小，其生產分裝誤差更大，在冷凍干燥后，取出封口的過程中易受潮，導致水分的增加影響內毒素工作品的穩定性，也必然存在支間差異。同時在使用時由于內毒素活性單位小不用稀釋，導致輔型劑介子濃度太高，影響試驗結果。
嚴格的說，把細菌內毒素工作品分裝生產成≤1EU/瓶直接用做實驗是不妥的，可能影響實驗結果的可靠性。
綜上所述，我們建議在實施細菌內毒素檢查時，不要選用活性<1.0EU/支的細菌內毒素工作品，以避免鱟試劑實驗假陽性或假陰性結果的發生……
（本文完）
本文作者：莫水晶
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